CleanRNA DNase I (2 U/μL);CleanRNA  脱氧核糖核酸酶 I (2 U/uL)

产品简介

DNA 酶 I 是一种内切酶 ，可以消化单链和双链 DNA，产生单脱氧核苷酸或单链或双链寡脱氧核苷酸。它能 水解磷酸二酯键，生成含有 5'-磷酸基团和 3'-OH 基团的单脱氧核苷酸和寡脱氧核苷酸。DNA 酶 I 可以催化 多种形式的 DNA，如单链 DNA、双链 DNA ，甚至染色质（其切割速度受组蛋白影响）。DNase I 广泛用于 制备无 dna RNA；体外转录后去除模板 DNA；在 RT-PCR 和 RT-qPCR 反应前制备无 dna RNA；与 DNA   聚合酶 I 结合 ，通过缺口易位进行 DNA 标记；DNA 片段文库建设。

本品按 GMP 工艺要求生产 ，产品以液体形式提供。

 

产品信息

货号	N120005E/N120005S/N120005M
规格	500 U/2000 KU/10 KU

 

产品性质

来源	重组 dna 酶 I 基因大肠杆菌
最适温度	37℃
储存缓冲液	10 mM Tris-HCl pH 7.6 ，2 mM CaCl2 ，50%(v/v) Glycerol
活性单位定义	以小牛胸腺 DNA 为底物，在 25°C 和 pH 5.0 条件下，在 1 分钟内将反应溶液 260 nm 处的吸光度提高 0.001 所需的酶量定义为一个活性单位（Kunitz unit）（反应缓冲液 为 ：10 mM Tris-HCl pH 7.6, 2.5 mM MgCl2, 0.5 mM CaCl2, 1  μg 质粒 DNA）

 

组分信息

组分编号	组分名称	N120005S （500 U）	N120005M （2 KU）	N120005M （10 KU）
N120005	CleanRNA 脱氧核糖核酸酶 I（2U/uL）	100 μL	1 mL	1 mL

 

储存条件

干冰装运 ，可在-15℃~ -25℃下保存一年。

 

注意事项

1.     酶在使用时应保存在冰盒或冰浴中 ，使用后应立即保存在-20°C。

2.     为了您的安全和健康 ，操作本产品时请穿戴个人防护装备（PPE） ，如实验室工作服和一次性手套。

 

使用说明

1.     质粒模板消化

1)     反应系统:

使用无 rnase 离心管和移液头制备如下反应体系：

10× DNase I Buffer*	1 μL
DNase I	1 μL
RNA	x
Rnase-free ddH2O	Up to 10 μL

【注意】 1×DNase I 缓冲液：10 mM Tris-HCl ，2.5 mM MgCl2, 0.5 mM CaCl2 ，pH7.6 @25℃。

2)     反应条件

37℃ ,  15- 30min 后，加入终浓度为 2.5 mM 的 EDTA 溶液，在 65℃下搅拌 10 min。处理后的模板可用于 后续反应 ，如盖帽反应。

2.     DNase I 失活或抑制

加入 EDTA 至终浓度 2.5 mM 后，65℃加热 10min 可使 DNase I 失活。苯酚和氯仿萃取也可使 DNase I 失 活。以下条件对 DNase I 均有显著抑制作用：金属离子螯合剂、浓度为毫摩尔/升的锌离子、0.1% SDS、

DTT、巯基乙醇等还原剂 ，盐浓度在 50-100 mM 以上。