产品简介
本试剂盒配备了强力的裂解缓冲液,可以快速裂解样品(如鼠尾、鼠耳、鼠趾、肌肉等),释放基因组DNA。裂解液可以直接加入到PCR反应体系中,无需精提纯化,操作方便。此外,本试剂盒对样品投入量要求低,5 mg小鼠组织或1-5 mm鼠尾即可进行实验。本试剂盒是小鼠组织直接PCR试剂盒(Cat#N132028)的裂解组分,裂解后的产物与小鼠组织直接PCR试剂盒中2×Mouse Direct PCR Mix(N132028-C)或2×HotStart PCR Genotyping Master Mix(With Dye) (Cat#N132004)搭配使用,扩增效果更佳。
产品规格
产品货号 |
N132028E |
N132028S |
产品规格 |
50 T |
200 T |
组分信息
组分编号 |
组分名称 |
N132028E (50 T) |
N132028S (200 T) |
N132028-A |
Buffer ML |
1×5 mL |
20×1 mL |
N132028-B |
Buffer MT |
0.6 mL |
1.25×2 mL |
产品储存
1. 组分 A:2-8℃保存,有效期1年。若多次使用,请分装冻存,避免交叉污染。
2. 组分 B:-25~-15℃保存,避免反复冻融。有效期1年。
操作注意
1) 为了避免样本间交叉污染,每次取样后都需要将取样器材的刃口或与样本直接接触的部位浸入2%次氯酸钠溶液中,反复 洗刷数次,然后用干净的纸巾擦干残余液体后再进行使用。为了试验方便,也可准备多个取样器材,在使用完后进行统一清洗,确保每一单独样本均使用的是无污染的取样器材。
2) 建议使用新鲜采取的动物组织,若为长期冷冻组织,应尽量避免反复冻融,否则会导致模板的降解,影响PCR效率。
3) 为了您的安全和健康,请穿实验服、佩戴口罩、眼罩、一次性手套等采取防护性措施进行实验操作。
4) 本产品仅作科研用途!
操作说明
样品基因组DNA释放
1. 剪取5-10 mg动物组织或1-5 mm鼠尾,置于1.5 mL离心管中;
2. 在上述离心管中加入90 μL Buffer ML,轻轻涡旋使得样品完全被裂解液浸润,短暂离心;
3. 在恒温孵育仪中设置95℃孵育15 min;
4. 加入10 μL Buffer MT,轻弹混匀,终止裂解;
5. 选做步骤:12,000 rpm离心2 min;
6. 将上清转移至新的离心管,4℃或-20℃保存或直接取上清用于后续PCR扩增。
【注】:
*组织应尽量剪碎,以便裂解反应更顺利进行。
**95℃孵育,一般15 min即可满足多数PCR需求。若需要的DNA量较大或样品较难裂解,可将时间延长至30 min。组织块不需完全裂解,残余的部分在后续离心步骤中可被除去。
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