产品简介
Celthy SureXcel 3000是一款基于新型多聚体高分子材料开发的升级版核酸转染试剂。本转染试剂细胞毒性极低,同时利用特异性抗酶降解机制,在递送过程中有效保护核酸免受破坏,最大限度提升转染效率。不同于脂质体转染试剂,本试剂由于细胞毒性很低,对于比较脆弱的细胞,也能够温和的进行转染。适用于DNA、siRNA、miRNA、mRNA及ASO等多种核酸类型,在293T、HeLa、MCF7、HepG2、A549、NIH3T3、RAW267.4、HCT116及原代细胞中进行验证,可实现高效转染。
产品信息
货号 |
C130010E |
C130010S |
C130010M |
规格 |
25 μL |
100 μL |
1.5 mL |
储存条件
2~8℃保存, 有效期1年。
注意事项
1,特别注意,请务必按照说明书加样顺序配制转染复合物。
2,本转染试剂需恢复至室温,涡旋、瞬离后使用。
3,加入配制完的转染复合物后,无需换液(如在加完转染复合物12 h观察到有细胞生长缓慢,可在12 h进行换液)。
4,本品可转染DNA、mRNA siRNA、miRNA、ASO。
5,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
6,本产品仅用于科研。
使用说明
1,DNA转染
【注】转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,建议初次使用时设置梯度预实验进行使用量优化。
1)细胞铺板。至转染操作时,以细胞融合度达70%-90%为佳。
2)按照下表使用Opti-MEM培养基稀释Celthy SureXcel 3000转染试剂溶液,轻轻混匀。
3)使用Opti-MEM培养基稀释DNA,得到DNA预混液,然后添加Enhancer转染增强剂溶液,轻轻混匀, 得到稀释的DNA。
4)将稀释的DNA加入已稀释的Celthy SureXcel 3000转染试剂溶液中(1:1比例)。
5)室温孵育10-15分钟。
6)将DNA-转染试剂复合物逐滴加到细胞中, 轻轻混匀。
2,siRNA转染
转染siRNA操作与 DNA的转染操作流程一样, 但在稀释siRNA时则不需要加入Enhancer转染增强剂。
3,mRNA转染
转染mRNA操作及用量与DNA的转染操作流程一样, 但在稀释mRNA时则不需要加入Enhancer转染增强剂。
不同细胞培养容器转染用量(仅供参考):
培养皿 |
96-well |
24-well |
6-well |
|
贴壁细胞 |
1-4X104 |
0.5-2X105 |
0.25-1X106 |
|
使用Opti-MEM培养基稀释 Celthy SureXcel 3000转染试剂溶液,轻轻混匀 |
Opti-MEM培养基 |
5 μL |
25 μL |
125 μL |
Celthy SureXcel 3000转染试剂溶液 |
0.2 μL |
1 μL |
5 μL |
|
使用Opti-MEM培养基稀释DNA,得到DNA预混液, 然后添加Enhancer转染增强剂溶液, 轻轻混匀, 得到稀释的 DNA |
Opti-MEM培养基 |
5 μL |
25 μL |
125 μL |
DNA(0.5-5 g/μL) |
0.1 μg |
0.5 μg |
2.5 μg |
|
Enhancer转染增强剂 溶液(2 ul/μg DNA) |
0.2 μL |
1 μL |
5 μL |
|
将稀释的DNA加入已稀释的 x剂溶液中 (1:1比例). |
稀释的DNA |
5 μL |
25 μL |
125 μL |
稀释的Celthy SureXcel 3000转染试剂溶液 |
5 μL |
25 μL |
125 μL |
|
室温孵育10-15分钟 |
||||
DNA |
复合物成分(每孔) |
96-well |
24-well |
6-well |
Opti-MEM培养基 |
10 μL |
50 μL |
250 μL |
|
DNA(0.5-5 ug/μL) |
0.1 μg |
0.5 μg |
2.5 μg |
|
Celthy SureXcel 3000转染试剂溶液 |
0.2 μL |
1 μL |
5 μL |
|
Enhancer转染增强剂溶液 |
0.2 μL |
1 μL |
5 μL |
|
将DNA-转染试剂复合物逐滴加到细胞中, 轻轻混匀。 |
DNA-转染试剂复合物 |
10 μL |
50 μL |
250 μL |
【注】该表使用量仅供参考, DNA与Celthy SureXcel 3000转染试剂溶液具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在1:0.5-1:5之间。
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