3D ATP BioLumi Cell Viability Assay Kit；3D细胞活力检测试剂盒

产品简介

ATP 是细胞内重要的能量分子，可以用来衡量细胞增殖活力水平，与活细胞数目具有良好的线性关系,  因此，ATP含量能够反映活细胞数量。本试剂盒借ATP依赖的荧光素酶催化的荧光素发光反应，通过检测化学发光信号测定细胞内ATP 含量，从而检测细胞活力或定量检测活细胞数目。

本试剂盒灵敏度高、线性范用广，适用于3D培养细胞的活力分析。在培养细胞的孔板中加入本产品使细胞团裂解，释放出ATP，即可与试剂发生如图所示的反应，发出稳定的光信号，从而对细胞活力进行检测。

产品信息

货号	C331311E	C331311S	C331311M
规格	10 mL	100 mL	10×100 mL

储存条件

-20℃以下冷冻保存，避免反复冻融，保质期为5年。-15~-25℃避光保存，有效期1年。2-8℃避光保存，可稳定存放2天。

注意事项

1. 试剂中含有荧光素酶，反复冻融会影响其活性。建议分装后置于-20℃避光保存。试剂及细胞样品使用前均需平衡至室温，以避免酶催化效果的影响。
2. 萤光素酶的发荧光素酶的反应速率和发光强度受化学环境影响。不同类型的培养基和血清中发光强度和衰减速率存在差异。另外，药物含量较高时可能会干扰荧光素酶反应，从而影响发光信号。建议设置含有药物的细胞培养液对照孔以排除溶剂的干扰。
3. 本试剂对光敏感，如果储存时暴露在光照下，会加快发光强度的衰减。如果试剂从原来的容器转移，请确保避光保存。
4. 操作时避免多次将枪头尖端插入试剂瓶中。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
6. 本产品仅用于科研。

使用说明

1. 试剂准备：融解冻存的3D发光法检测试剂，如有必要可适当分装该试剂。在使用前将适量试剂平衡至室温。上下颠倒轻柔混匀，以获得均质溶液。
2. 使用适合进行化学发光检测的96孔板，在其中加入含有细胞培养基的微组织。

【注】制备样品体积和微组织特性（例如，大小、数量、培养天数等）应针对实验条件进行优化。样品的总ATP含量应保持在10 mM以下（测定线性范围上限浓度）。多孔板必须与使用的光度计兼容。

3. 根据您的培养方案进行孵育。

【注】确保样品和测试化合物的体积足够低，以允许添加等体积的试剂，然后进行混合，而不会造成孔间污染。

4. 将检测试剂加入与待测样品等体积的培养基中（例如，对于96孔板，将100 μL检测试剂添加到100 μL含有细胞的培养基中）。
5. 振荡混匀5 min，促进细胞团裂解（检测试剂渗透进入微组织及发光信号趋于稳定的时间与细胞的种类、培养时间、微组织的大小都有一定的关系，可以使用移液器反复吹打来代替振荡）。
6. 让96孔板在室温下再孵育25分钟以稳定发光信号96孔板。
7. 使用具有检测化学发光功能的多功能酶标仪进行化学发光检测。请根据仪器要求设置相应的参数，每个孔的检测时间一般为0.25秒或更长时间，具体需根据仪器的检测灵敏度进行适当的调整。记录发光值 。