Fast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix ;快速反转录预混液(含gDNA消化,用于qPCR)

产品简介

本产品是品牌首推的高性能cDNA合成试剂,具有更快的反转录速度更高的反转录产量,以及极强的残留物耐抑制性,适用于动物、植物以及微生物RNA的反转录反应。同时,试剂中所含的gDNA Digester Mix可消化达1000 ngDNA可有效避免RNA模板中残留DNA污染,保证后续结果更加可靠。

本产品反转录产物,可用于下游qPCR应用。推荐搭配:通用多重qPCR探针法预混液(Cat#N132041)、通用qPCR染料法预混液(Cat#N132031)或可示踪qPCR染料法预混液(Cat#N132034Cat#N132035Cat#N132036进行高性能的基因表达分析。

产品规格 

产品货号

N132062E

N132062S

产品规格

10 T

100 T

产品组分

组分编号

组分名称

N132062E

N132062S

N132062-A

cDNA Fast Synthesis SuperMix

60 μL

600 μL

N132062-B

gDNA Digester Mix

20 μL

200 μL

N132062-C

RNase-free H2O

200 μL

2×1 mL

产品储存

-25~ -15℃保存,有效期1年。

操作注意

1. 加样和配液步骤都尽量在冰上操作。

2. 每个组分在使用前都应上下颠倒混匀,低速离心。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4. 本产品仅作科研用途!

操作说明

一、含gDNA去除反转录步骤

1. DNA消化

RNase-free离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。37℃孵育2 min

组分

使用量

gDNA Digester Mix

2 μL

Total RNA or mRNA

Total RNA10 pg-2 μg

mRNA10 pg-500 ng

RNase-free H2O

Up to 14 μL

【注】:建议Total RNA的投入量不超过2 μg。如果目的基因表达丰度低,可增加投入量至最多5 μg

2. 反转录体系配置(以20μL为例)

组分

使用量

上一步反应液

14 μL

cDNA Fast Synthesis SuperMix

6 μL

3. 反转录程序设置

温度

时间

50

5 min

85

5 sec

【注】:逆转录产物可直接进行下游qPCR检测。若短时间内不进行下游实验,可放置于4℃保存。若长期保存,建议分装后,于-20°C保存,避免反复冻融。

二、不含gDNA去除反转录步骤

1. 反转录体系配置(以20μL为例)

组分

使用量

cDNA Fast Synthesis SuperMix

6 μL

Total RNA or mRNA

Total RNA10 pg-2 μg

mRNA10 pg-500 ng

RNase-free H2O

Up to 20 μL

2. 反转录程序设置

温度

时间

50

5 min

85

5 sec

【注】:逆转录产物可直接进行下游qPCR检测。若短时间内不进行下游实验,可放置于4℃保存。若长期保存,建议分装后,于-20°C保存,避免反复冻融。

 

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